1) 0,5 ninidrina in 10mL di etanolo
2) 80g fenolo in 20 mL di etanolo
3) 0,4 ml di KCNaq 0,001 M in 20 mL di piridina
Si preleva con la spatola una punta di resina e metterla in una provetta, lavare in metanolo e decantare, aggiungere un paio di gocce di ciascun reagente del kit nell'ordine 1, 2 e 3.
mettere la provetta sulla piastra a 110°C per 3-4 minuti.
Se sono presenti ammine libere il test è positivo e diventa blu.
Per un micromole di ammina/ g di resina equivalente il test ha il 99,5% di efficienza.
N.B.: Ser,Arg e Asp non danno sempre il blu. La Pro avendo un'ammina secondaria assume una colorazione marrone; I resuidi N-terminali di Pro necessitano di un monitoraggio con il test del chloranil (2,3,5,6-tetracloro-1,4-benzochinone), esso reagisce con le ammine primarie e secondarie in presenza di acetone e acetaldeide rispettivamente assumendo il colore green-blue benzochinone.
Ricapitolando:
resina bianca-------- kaiser test negativo---- ammina protetta o assente
resina blu------------ kaiser test positiva----- ammina deprotetta o libera
resina celeste-------- kaiser test parzialmente positivo----ammina è parzialmente deprotetta
Che bello tornare a leggere un tuo post! :)
RispondiEliminaOra, non ti voglio rovinare i commenti (^^) quindi ne faccio una parte seria e, poi, una meno seria :D
Quella seria è che deve essere una figata fare questi esperimenti in laboratorio, soprattutto se, come te, si sa quello che si sta combinando e si possono così evitare danni a cose, persone, strutture ^^ Credo che la scienza possa essere molto molto interessante se approcciata e spiegata nel modo giusto, ho sempre notato che tu questo sai farlo, quindi beh, te ne rendo merito :)
Per il commento sciocco (anche volgare se vogliamo ^^), beh... ho pensato a quel monello del nostro amico Saccottino Snobbino vedendo le provette... poi come "unire" lui e le provette... lo faccio immaginare a te.... :)))))))
In ogni caso lo odio, mi irrita il suo comportamento e voglio che il web lo sappia :D :D :D
Un abbraccione :)